Baltymo kiekio nustatymas Bredfordo metodu

Ištrauka

Baltymo kiekio nustatymas Bredfordo metodu

Tikslas:
Nustatyti baltymo kiekį mėginyje Bredfordo metodu.

Darbo eiga – rezultatai
1.Į 8 mėgintuvėlius pripyliau atitinkamai 5, 10, 15, 20 µL jaučio serumo albumino tirpalo ir į
kiekvieną mėgintuvėlį įpyliau atitinkamai iki 100 µL 0,15M NaCl tirpalo. Į 9 ir 10
mėgintuvėlius įpiliau tik po 100 µL 0,15M NaCl tirpalo.
2.Į visus mėgintuvėlius įpyliau po 1 ml Kumasi briliantinio mėlio G250 ir sumaišiau. Laikiau
kambario temperatūroje 5 min.
3.Spektrofotometru išmatavau sugertį ties λ=595nm. Nubraižiau kalibracinę kreivę.
4.Nežinomos koncentracijos baltymą skiedžiau 10 kartų. Į 10 µL baltymo įpyliau 90 µL
vandens. Paėmiau 2 µL tirpalo, įpyliau iki 100 µL 0,15M NaCl tirpalo ir 1 ml Kumasi dažo.
Sumaišiau ir 2min laikiau kambario temperatūroje.
5.Spektrofotometru išmatavau baltymo sugertį, baltymo kiekį nustačiau iš kalibracinės
kreivės.