Aminorūgščių ir nukleotidų nustatymas plonasluoksnės chromatografijos būdu

Ištrauka

Aminorūgščių ir nukleotidų nustatymas plonasluoksnės chromatografijos būdu

Tikslas: Plonasluoksnės chromatografijos metodu išfrakcionuoti nukleotidus ir aminorūgštis.

Darbo eiga:

1.Chromatografinėje plokštelėje 2,0 cm atstumu nuo krašto nubrėžėme starto liniją.

2.Ant starto linijos 1-2 cm atstumu vienas nuo kito mikrošvirkštu užlašinome tiriamųjų medžiagų mėginius. 3.Plokštelėje užlašinome ir nežinomos medžiagos tirpalus.

4.Palaukėme, kol dėmės išdžius. Po to chromatografinę plokštelę patalpinome į chromatografinį indą su tirpiklių sistema taip, kad tirpiklis nesiektų starto linijos.

5.Chromatografiją vykdėme 1-1,5val., paskui plokštelę išėmėme ir išdžiovinome kambario temperatūroje, traukos spintoje.

6.Vaizdavimas: aminorūgščių lokalizacijos vietas nustatėme apipurškiant 0,1% acetoniniu ninhidrino tirpalu. Nukleozidus ir nukleotidus chromatogramoje radome apšviečiant chromatografinę plokštelę UV šviesa. 7.Chromatogramose pažymėjome tirpiklių sistemos fronto liniją ir junginių atstumus nuo starto linijos iki dėmės centro. Rezultatus surašėme į 1 lentelę.

8.Pagal formulę Rf = a b apskaičiavome žinomų ir nežinomų medžiagų Rf, duomenis surašėme į 1 lentelę.