Vaistinės medetkos (lot. Calendula officinalis L.) kaliaus kultūrų ekstraktų kiekybinis fitocheminių junginių ir biologinio aktyvumo įvertinimas

Ištrauka

Cheminės technologijos fakultetas
Vaistinės medetkos (lot. Calendula officinalis L.) kaliaus kultūrų ekstraktų kiekybinis fitocheminių junginių ir biologinio aktyvumo įvertinimas
Baigiamasis magistro projektas

Turinys
Lentelių sąrašas 8
Paveikslų sąrašas 9
Santrumpų ir terminų sąrašas 11
Įvadas 12
1. Literatūros apžvalga 13
1.1. Astrinių šeimos augalų charakteristika 13
1.1.1. Vaistinės medetkos (lot. Calendula officinalis L.) charakteristika 13
1.2. Bioaktyviųjų metabolitų apibūdinimas vaistinės medetkos ekstraktuose 14
1.2.1. Antioksidantai 14
1.2.2. Fenoliniai junginiai 15
1.2.3. Karotinoidai 16
1.3. Augalinių ekstraktų gavimo būdai 17
1.4. Vaistinės medetkos kaliaus kultūros in vitro augalų biotechnologijoje 19
1.4.1. Fitohormonai 20
1.5. Vaistinės medetkos kaliaus kultūrų in vitro ekstraktų biologinis aktyvumas 21
1.6. Vaistinės medetkos panaudojimo galimybės 22
1.7. Literatūros apžvalgos apibendrinimas 23
2. Medžiagos ir tyrimo metodai 24
2.1. Tyrimo objektas 24
2.2. Tyrimui naudoti reagentai 24
2.3. Tyrimams naudota aparatūra 24
2.4. Augalų sėklų sterilinimas 24
2.4.1. Vaistinės medetkos sėklų sterilinimas 24
2.5. Augimo reguliatorių paruošimas 24
2.6. Vaistinės medetkos antioksidacinio aktyvumo nustatymas 25
2.6.1. Antioksidacinio aktyvumo nustatymas DPPH metodu 25
2.6.2. Redukcinių savybių nustatymas 25
2.6.3. Antioksidacinio aktyvumo nustatymas FRAP metodu 26
2.7. Vaistinės medetkos antioksidacinių fermentų aktyvumo įvertinimas 26
2.7.1. Superoksido dismutazės aktyvumo nustatymas 26
2.7.2. Askorbatperoksidazės aktyvumo nustatymas 27
2.7.3. Katalazės aktyvumo nustatymas 28
2.7.4. Prolindehidrogenazės aktyvumo nustatymas 28
2.8. Fenolinių junginių įvertinimas 28
2.8.1. Bendras fenolinių junginių kiekybinis įvertinimas Folin-Ciocalteu‘o metodu 28
2.8.2. Bendrosios fenolinių rūgščių koncentracijos nustatymas 29
2.9. Flavonoidų koncentracijos nustatymas 30
2.9.1. Bendrosios antocianinų koncentracijos nustatymas 30
2.10. Chlorofilo a ir b bei karotinoidų koncentracijos nustatymas 31
2.11. L-Prolino nustatymas 31
2.12. Malondialdehido (MDA) koncentracijos nustatymas 32
2.13. Antibakterinis aktyvumas 32
3. Tyrimų rezultatai ir jų aptarimas 34
3.1. Vaistinės medetkos antioksidacinio aktyvumo įvertinimas 34
3.1.1. Antioksidacinio aktyvumo įvertinimas DPPH metodu 34
3.1.2. Antioksidacinio aktyvumo įvertinimas redukcinių savybių nustatymo metodu 35
3.1.3. Antioksidacinio aktyvumo įvertinimas FRAP metodu 36
3.1.4. Antioksidacinio aktyvumo tyrimų apibendrinimas 37
3.2. Vaistinės medetkos antioksidacinių fermentų aktyvumo įvertinimas 38
3.2.1. Superoksido dismutazės (SOD) aktyvumo įvertinimas 38
3.2.2. Askorbatperoksidazės aktyvumo įvertinimas 39
3.2.3. Katalazės aktyvumo įvertinimas 39
3.2.4. Prolindehidrogenazės aktyvumo įvertinimas 40
3.2.5. Antioksidacinių fermentų aktyvumo įvertinimo apibendrinimas 41
3.3. Bendrosios fenolinių junginių koncentracijos įvertinimas 41
3.3.1. Bendrosios fenolinių rūgščių koncentracijos įvertinimas 42
3.4. Flavonoidų koncentracijos įvertinimas 43
3.4.1. Bendrosios antocianinų koncentracijos įvertinimas 44
3.5. Chlorofilo a ir b bei karotinoidų koncentracijos įvertinimas 45
3.6. L-Prolino koncentracijos įvertinimas 48
3.7. Malondialdehido (MDA) koncentacijos įvertinimas 48
3.8. Antibakterinio aktyvumo įvertinimas 49
4. Rekomendacijų dalis 51
Išvados 53
Literatūros sąrašas 54
Priedai 60
1priedas. MS maitinamosios terpės paruošimas 60
2priedas. MS maitinamosios terpės paruošimui reikalingi reagentai 60
3priedas. Vaistinės medetkos (lot. Calendula officinalis L.) kaliaus kultūros in vitro 60

Įvadas
Augalai yra vertingas vaistinių medžiagų šaltinis, atliekantis gyvybiškai svarbų vaidmenį siekiant
sumažinti bendras pasaulines sveikatos problemas. Pasaulio sveikatos organizacijos (WHO)
duomenimis, daugiau nei 80 % pasaulio gyventojų naudojasi tradicine liaudies medicina, kurios
didžiąją dalį sudaro augalinės kilmės vaistai. Augalai kaupia daugybę biologiškai aktyviųjų
medžiagų, kurios yra labai vertingos ir plačiai naudojamos ne tik vaistų, bet ir maisto, ir kosmetikos
pramonėje bei turi panaudojimo perspektyvas metabolizmo inžinerijoje, optimizuojant genetinius ir
reguliavimo procesus ląstelėse [1]. Šias bioaktyvias medžiagas sudaro augaluose biosintetinami
pirminiai ir antriniai metabolitai. Pirminiai metabolitai yra tarpiniai medžiagų apykaitos produktai,
kurie yra būtini augalo vystymuisi ir augimui bei dalyvauja svarbiuose medžiagų apykaitos
procesuose, tokiuose kaip kvėpavimas ir fotosintezė [1, 2]. Antriniai metabolitai yra pirminių
metabolitų dariniai, jų vykdomi procesai nėra tiesiogiai susiję su augalų vystymusi ir augimu, todėl
jų sintetinama nedideliais kiekiais. Jie taip pat atlieka svarbias funkcijas, padeda prisitaikyti prie
aplinkos sąlygų ir apsaugo augalus nuo aplinkos veiksnių [2, 3]. Antriniai metabolitai naudojami kaip
agrochemikalai, vaistai, skonio ir...